胚胎可在不同阶段进行冷冻保存,包括极体阶段(单个细胞),卵裂球阶段和胚泡阶段,只要其质量足够,就可以在进一步的移植中使用。为了在冷冻过程中保护胚胎免受损伤,胚胎会与冷冻保护液混合,然后将混合物置于塑料吸管或玻璃器具中,并使用专门的可编程液氮罐在极低温度下(-196℃)储存。传统的冷冻方法是通过缓慢冷却胚胎直至最终冻结来进行的,但与此方式相关的主要问题是可能形成损伤胚胎的冰晶。然而,新的玻璃化冷冻方法正在逐渐取代传统方法,因为它可以以超快速的速度冷冻,而不会产生冰晶。

解冻胚胎涉及从液氮中取出胚胎,然后在室温下解冻,去除冷冻保护液,并将胚胎与特殊培养基混合,然后将混合物保持在培养箱中以备移植。如果胚胎是在裂解阶段或胚泡阶段被冷冻的,则可以在同一天解冻。如果是在双细胞前阶段冷冻的,则需要在前一天解冻,并在过夜培养,直到它们发育成2-4个细胞胚胎才能进行解冻。